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小檗碱通过TGF-β/Smad通路抑制TGF-β1诱导的人肝癌HepG2细胞上皮间质转化的研究
作者:陈春苗 张国哲 刘平平 火跃芳 李廷利
关键词: 小檗碱; 人肝癌HepG2细胞; TGF-β1; 上皮间质转化; 细胞迁移; 细胞侵袭; TGF-β Smad信号通路;
摘要：目的探讨小檗碱（berberine）对转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1,TGF-β1）诱导的人肝癌HepG2细胞上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）的作用及其机制。方法 MTT法检测小檗碱对HepG2细胞增殖活性;采用10 ng·L-1 TGF-β1诱导HepG2细胞EMT模型形成,并加入小檗碱处理;克隆形成实验、细胞划痕和Transwell小室实验分别检测HepG2细胞的克隆形成能力、迁移和侵袭能力;免疫荧光法检测EMT间质标志物Vimentin的表达;Western blot法检测EMT标志物蛋白（E-cadherin、N-cadherin、Snail）、基质金属蛋白酶（MMP-2）、TGF-β/Smad通路蛋白（Smad2、p-Smad2、Smad3、p-Smad3）的表达。结果小檗碱呈浓度时间依赖性抑制HepG2细胞活性;与TGF-β1组比较,小檗碱可以明显抑制HepG2细胞的克隆形成能力、迁移和侵袭能力;并且小檗碱可以抑制TGF-β1上调的E-cadherin蛋白表达,和TGF-β1下调的N-cadherin、Vimentin、Snail、 MMP-2、p-Smad2、p-Smad3蛋白表达。结论小檗碱可能通过抑制TGF-β/Smad信号通路,干预TGF-β1诱导HepG2细胞的EMT进程,抑制HepG2细胞的迁移和侵袭能力。
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