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吡唑啉酮铜配合物通过内外信号途径诱导人肝癌细胞BEL-7404凋亡
作者:闫海力 李金耀 许贯诚 吴燕飞 李欣奕 王茹 李艳红 王小静 赵惠新 李金玉
关键词: 吡唑啉酮; 肝癌; 增殖; 凋亡; 线粒体; 死亡受体;
摘要:目的探讨新型吡唑啉酮铜配合物(P-FAH-Cu-bpy)对人肝癌细胞BEL-7404的诱导凋亡机制。方法通过溶液法制备得到吡唑啉酮铜配合物P-FAH-Cu-bpy。X-射线单晶衍射实验测定晶体结构。MTT法检测P-FAH-Cu-bpy体外对BEL-7404细胞活性的影响。倒置显微镜和Hoechst 33258染色法观察细胞及核形态变化。流式细胞术检测P-FAHCu-bpy对BEL-7404细胞凋亡、周期、ROS、线粒体膜电位的影响。划痕实验检测细胞迁移。Western blot检测P-FAHCu-bpy对BEL-7404细胞凋亡、迁移及侵袭相关蛋白表达的影响。结果 P-FAH-Cu-bpy是一个具有扭曲的四方锥构型的五配位铜(Ⅱ)配合物;呈浓度和时间依赖性地抑制了BEL-7404细胞增殖,诱导了细胞凋亡,将细胞周期阻滞在G2/M期,降低了细胞线粒体膜电位,增加了胞内ROS水平;上调了细胞Bax、细胞色素C、Cleaved-caspase-3/9/8和Cleaved-PARP表达量,而下调了caspase-7、Bcl-2表达水平;抑制了细胞的迁移和侵袭。结论 P-FAH-Cu-bpy通过内外凋亡信号途径抑制了人肝癌细胞BEL-7404生长。
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